出版社内容情報
構成および内容
第１章 序論
１ はじめに
２ ＤＮＡプローブの優秀性――その理論的背景――
３ ＤＮＡプローブ技術の現状
第２章 総論
１ 核酸ハイブリダイゼーションの原理
１．１ 原理
１．２ 実際上の問題
２ プローブの作成
３ 核酸ハイブリダイゼーション法による検査の利点と欠点
３．１ 利点
３．２ 欠点
４ おわりに
第３章 ＤＮＡプローブによる感染症の診断
１ 臨床微生物
１．１ 健康人体にみられる各種微生物（常在微生物叢）
１．２ 各種感染症の細菌学的診断
２ 感染症の診断の主力となるアッセイ方法
２．１ ドットハイブリダイゼーション法（スポットハイブリダイゼーション法）
２．２ コロニーハイブリダイゼーション法
２．３ Ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション法
２．４ 核酸サンドウィッチハイブリゼーション法
２．５ 展望
２．６ 時間解析蛍光測定法
３ 細菌感染症の診断
３．１ ブドウ容菌
３．２ 連鎖球菌
３．３ マイコバクテリウム
３．４ 淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）
３．５ サルモネラ菌
３．６ シュードモナス
３．７ キャンピロバクター
３．８ レジオネラ菌
３．９ 病原性大腸菌（Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）
３．１０ コレラ菌とエロモナス菌
３．１１ クラミジヤ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）
３．１２ マイコプラズマ
３．１３ 梅毒トレポネーマ
４ ウイルス感染症の診断
４．１ ウイルス（総論）
４．２ 最近のウイルス分離・同定法
４．３ 肝炎ウイルス
４．４ ＥＢウイルス（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒウイルス；ＥＢＶ）
４．５ サイトメガロウイルス（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ；ＣＭＶ）
４．６ 単純疱疹ウイルス（Ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ；ＨＳＶ）
４．７ 後天性免疫不全症候群（Ａｑｕｉｒｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ；ＡＩＤＳ）
４．８ スローウイルス感染症
４．９ パルボウイルス（Ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ）
４．１０ パピローマウイルス
４．１１ ウイロイド
５ 寄生虫感染症の診断
５．１ 寄生虫感染におけるＤＮＡプローブの利用
５．２ リーシュマニア症
５．３ マラリア
５．４ 他の寄生虫感染症に対するＤＮＡプローブの利用
５．５ ＤＮＡプローブの応用性
６ 抗生物質耐性遺伝子の検出
６．１ 新しい耐性遺伝子の識別
６．２ 院内感染の研究
６．３ 無差別伝播因子に関する研究
６．４ 感受性の研究
６．５ おわりに
７ 親和性に基づいた核酸ハイブリッド回収法（ａｆｆｉｎｉｔｙ－ｂａｓｅｄ ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ
第４章 ＤＮＡプローブによるヒトの遺伝子診断
１ はじめに――遺伝病とは――
２ 遺伝病の定義と特徴
２．１ 染色体異常による遺伝病
２．２ 単一遺伝子の突然変異による遺伝病
２．３ Ｘ連鎖疾患
２．４ 多因性遺伝疾患
３ 最近の遺伝病診断方法
３．１ 臨床症状の観察
３．２ 生化学的なマーカーの測定
３．３ 染色体分析
４ 遺伝病に対する出生前の診断
４．１ 出生前診断の必要性
４．２ 最近の診断法
５ ＤＮＡプローブの遺伝病診断への応用性
５．１ 直接検定法
５．２ 合成ＤＮＡプローブ法
５．３ ＲＦＬＰプローブ法
５．４ おわりに
６ 出生前診断におけるＤＮＡプローブ法の利点と欠点
６．１ ＤＮＡプローブ法の利点
６．２ ＤＮＡプローブ法の欠点
７ 遺伝病の治療
第５章 ＤＮＡプローブによるガン診断の可能性
１ ガン遺伝子
１．１ 活性化の定義と様式
１．２ レトロウイルスのガン遺伝子
１．３ ＤＮＡウイルスのガン遺伝子
１．４ プロトオンコ遺伝子
２ ガンの診断技術
２．１ 観血的技術
２．２ 直接診断機器（非観血的技術）
３ ＤＮＡプローブによるガン診断の可能性
３．１ ガン診断におけるガン遺伝子
３．２ 金焦遺伝子産物の検定
３．３ ＤＮＡプローブによるガン診断
３．４ おわりに
４ ＤＮＡプローブ利用の新しい試み
４．１ 腫瘍の分類――腫瘍の異種性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ）に対する分子論的基礎――
４．２ リンパ系新生物のＤＮＡ再編成と診断への応用性
５ 参考
第６章 遺伝子診断に関連した諸技術
１ フローサイトメトリーの利用
１．１ 染色体の分類と精製
１．２ フローカリオタイピング（Ｆｌｏｗ Ｋａｒｙｏｔｙｐｉｎｇ）
１．３ ソーティング（Ｓｏｒｔｉｎｇ）
１．４ 染色体のｉｎ ｓｉｔｕハイブリダゼーション
２ 電気泳動による巨大ＤＮＡ分子の分類
２．１ はじめに
２．２ パルスフィールドゲル電気泳動法（ＰＦＧＥ）
２．３ 市販のＰＦＧＥ装置
３ ＰＦＧＥによる制限酵素切断地図の作成
３．１ はじめに
３．２ 巨大ＤＮＡ分子の操作法
３．３ 大型制限酵素切断地図を作成する技術
３．４ 大型制限酵素切断地図作成技術の応用性
４ 巨大ＤＮＡ分子のｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでの取り扱い
４．１ 巨大ＤＮＡ分子丸ｉｎ ｖｉｔｒｏでの取り扱い
４．２ 巨大ＤＮＡ分子のｉｎ ｖｉｖｏでの取り扱い
５ ＤＮＡプローブによる転写タンパク因子の同定と精製
５．１ はじめに
５．２ ビオチン標識アフィニティークロマトグラフィー法
５．３ 合成オリゴヌクレオチドを用いた紫外線クロスリンキング法
５．４ オリゴヌクレオチドと転写因子との複合体の性状
５．５ おわりに
６ 酵素的増幅法を利用した特異的塩基配列の遺伝子解析
６．１ はじめに
６．２ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）法によるＤＮＡ断片の増幅
６．３ ＰＣＲ法によるクローニングと直接的な塩基配列の決定
６．４ 対立遺伝子に特異的なオリゴヌクレオチブプローブを使ったＰＣＲ法増幅ＤＮＡの解析
７ 電顕レベルでのｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション
７．１ はじめに
７．２ 原理徳実験の概略
７．３ 各ステップの操作手順
７．４ 検出の実例
７．５ 応用性
７．６ プローブ 検出系の改良
８ ＤＮＡ鎖の一塩基変化を検出する方法
８．１ はじめに――一塩基突然変異の重要性――
８．２ ＲＦＬＰ法と合成ＤＮＡプローブ法
８．３ 新しい一塩基変化検出法
８．４ 応用性
９ ＤＮＡ鎖置換検定法
９．１ はじめに
９．２ ＤＮＡ鎖置換検定法の原理
９．３ ＤＮＡ鎖置換検定法の特徴
９．４ ホモローガスな塩基配列に対する要求性
９．５ ＲｅａＡや反応効率促進剤を使ったＤＮＡ鎖置換検定法
９．６ ＤＮＡ鎖置換検定法の意義
１０ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ＲＮＡ法
１０．１ はじめに
１０．２ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ＲＮＡ
１０．３ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ＲＮＡ法の意義
第７章 非放射性ハイブリダイゼーションプローブの開発
１ はじめに
２ Ｂｉｏ－ｐｒｏｂｅ法
２．１ 原理
２．２ 実際の操作について
２．３ 実験例
３ Ｐｈｏｔｏｂｉｏｔｉｎ法
３．１ 原理
３．２ 操作
３．３ 実験例
４ Ｂｌｕ ＧＥＮＥ法
５ Ｃｈｅｍｉｐｒｏｂｅ法
５．１ 原理
５．２ 実験例
６ Ｌａｂｅｚｙｍｅ－ＰＯＤ法
７ まとめ
８ 検出のための発色反応
８．１ ペルオキシダーゼ系
８．２ アルカリウォスファターゼ系
８．３ 今後の展望
９ ＳｔｒＡｖｉＧｅｎキットの利用
９．１ プローブ検出への利用
９．２ 実験例――ＢｌｕＧＥＮＥ法との比較――
１０ 市販のビオチン標識ＤＮＡプローブ
１０．１ Ｐａｔｈｏ－Ｇｅｎｅキット
１０．２ ｄｅｏｘｙ Ｂｉｏ－ＰｒｏｂｅＴＭ（標識プローブ）
１１ ビオチン化ヌクレオチド
１１．１ ビオチン化ヌクレオチドとその利用
１１．２ ビオチン化ヌクレオチドの製品管理
１１．３ ビオチン化ヌクレオチドを利用した末端標識法とＢｉｏ－Ｂｒｉｄｇｅ標識法
１２ ＲＮＡの非放射性標識
第８章 合成オリゴヌクレオチドプローブ
１ 合成オリゴヌクレオチドの応用性
１．１ リンカーとアダプター
１．２ プライマー
１．３ プローブ
１．４ 部位特異的突然変異の誘発
１．５ 市販の標識合成オリゴヌクレオチドプローブ
２ 一塩基だけ異なるＤＮＡを識別するためのオリゴヌクレオチドプローブ
２．１ 合成オリゴデオキシリボヌクレオチド
２．２ 一塩基だけ異なるＲＮＡの識別
２．３ 合成オリゴヌクレオチドプローブの応用性
第９章 展望
１ はじめに
２ 今後の課題
２．１ 特異的核酸プローブの開発
２．２ 核酸プローブ増幅法の開発
２．３ 標識法の開発
２．４ 検出系の開発
２．５ ハイブリダイゼーション法の検討
２．６ 検体処理方法の開発
３ 現状と将来への期待
内容説明
本書はＤＮＡプローブ利用技術の基礎から応用までを、周辺技術を含めて一冊にまとめた。またＤＮＡプローブの普及の鍵を握ると思われる非放射性プローブの開発については、特に一章を設けて詳説した。
目次
第１章 序論
第２章 総論
第３章 ＤＮＡプローブによる感染症の診断
第４章 ＤＮＡプローブによるヒトの遺伝子診断
第５章 ＤＮＡプローブによるガン診断の可能性
第６章 遺伝子診断に関連した諸技術
第７章 非放射性ハイブリダイゼーションプローブの開発
第８章 合成オリゴヌクレオチドプローブ
第９章 展望
著者等紹介
高橋豊三［タカハシトヨゾウ］
１９４８年神奈川県に生まれる。１９７２年横浜市立大学医学部助手。１９７４年横浜中央病院付属高等看護学校非常勤講師。１９８２年医学博士号取得（横浜市立大学３００号）。１９８２年スイス国バーゼル免疫学研究所に留学。１９８２年米国カルフォルニア大学バークレー校に留学。１９８４年横浜市立大学医学部付属高等看護学校非常勤講師。１９８４年横浜市立大学医学部助教授（細菌学教室）。１９８７年横浜市立大学医学部付属高等看護学校運営役員。著書に「細菌のＬ型菌と臨床医学との関連性」最新医学、３５，１８５５－１８６１（１９８０）。「ファージベクターによるクローニングＩ．ベクター両腕の調整法」、“免疫実験操作法ＸＩＩＩ”、（日本免疫学会編）（１９８４）。「ファージベクターによるクローニングＩＩ．Ｐａｃｋａｇｉｎｇ ｍｉｘｔｕｒｅの調整法」、“免疫実験操作法ＸＩＩＩ”、（日本免疫学会編）（１９８４）。「ファージベクターによるクローニングＩＩＩ．Ｌｉｇａｔｉｏｎ反応とＩｎ ｖｉｔｒｏＰａｃｋａｇｉｎｇ」、“免疫実験操作法ＸＩＩＩ”、（日本免疫学会編）（１９８４）。「感染－体液性免疫の役割」、“細菌学はここまで進んだ”、（日本細菌学会編）、菜根出版（１
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